iTunes 7 目前可以讀取、寫入以及轉換於 MP3、AIFF、WAV、MPEG-4、AAC 與 Apple Lossless 之間。
iTunes 也能播放任何 QuickTime 能播放的 (甚至是一些視頻格式),包括來自 iTunes Store 與 Audible. com 有聲書的 受保護的 AAC 檔案。為了播放其他格式,例如內含 Ogg 的 Vorbis 或 Speex 編碼,iTunes 需要安裝 Xiph QuickTime 元件。iTunes 目前不能正確地播放 HE-AAC/aacPlus 音頻串流。HE-AAC/aacPlus 格式檔案能播放成 22 kHz AAC 檔案 (實際上其沒有超過 11 kHz 高音界線)。HE-AAC 串流音頻 (一些 Internet Radio 頻道所使用) 完全無法播放。
iTunes 的 Windows 版本能自動地轉換未受保護的 WMA (包括版本 9) 檔案至其他的音頻格式,但它不支持直接播放或編譯過的 WMA 格式。